大赛璐多糖衍生物反相手性柱CHIRALPAK AD-H,AS-H、CHIRALCEL OD-H,OJ-H以及新型手性柱CHIRALPAK AY-H和CHIRALCEL OZ-H在正相领域中获得了广泛的应用,大赛璐同时也开发了相应的反相手性柱。与正相柱相比较,反相柱涂敷的手性聚合物与正相柱相同,但是所用的硅胶基质有所不同。反相柱使用水-有机溶剂流动相,适合分析水溶性样品(比如生物活性样品),或者对pH有特定要求的样品。要避免极端pH,因为这样会损伤固定相的硅胶基质。反相柱也适合应用于LC/MS中。流动相:CHIRALPAK AD-RH/AS-RH中性化合物酸性化合物碱性化合物水溶液(90%-0%)水溶液(85%-0%)水溶液(85%-0%)水50mMpH2磷酸缓冲液或者pH2的磷酸水溶液20mMpH8磷酸缓冲液或者20mMpH9硼酸缓冲液有机溶剂(10%-100%)有机溶剂(15%-100%)有机溶剂(15%-100%)乙腈/甲醇/乙醇或异丙醇乙腈/甲醇/乙醇或异丙醇乙腈/甲醇/乙醇或异丙醇 典型的起始流动相 50%水溶液-50%有机溶剂 CHIRALCEL OD-RH/OD-R/OJ-RH中性化合物酸性化合物碱性化合物水溶液(90%-0%)水溶液(85%-0%)水溶液(85%-0%)水200mMpH2磷酸缓冲液或者pH2的磷酸水溶液50mMNaPF6或者KPF6水溶液(用磷酸调pH至2.0)有机溶剂(10%-100%)有机溶剂(15%-100%)有机溶剂(15%-100%)乙腈/甲醇/乙醇或异丙醇乙腈/甲醇/乙醇或异丙醇乙腈/甲醇/乙醇或异丙醇 典型的起始流动相 60%水溶液-40%有机溶剂 反相手性柱如果使用过缓冲液,保存前务必先冲洗干净。为了延长柱寿命,推荐使用保护柱,特别是使用碱性流动相的场合。