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PEI 细胞转染液

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所在地: 江苏 泰州市
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更新日期: 2017-04-05 11:18
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【PEI 细胞转染液】详细说明
 细胞转染液(核心成分为线性聚乙烯亚胺,也称作LPEI),是新一代的转染试剂,带正电的聚合物与核酸带负电的磷酸基团 形成带正电的复合物后与细胞表面带负电的蛋白多糖相互作用,并通过胞吞作用进入细胞。除了具有阳离子脂质体(如:Lipo2000,3000)的转染效率高,操作简单,适用范围广,重复性好等特点外,还具有在体内,转染效率高,细胞毒性低等特点。

   EZ Trans是一种具有较高的阳离子电荷密度的有机大分子,每相隔二个碳个原子都是质子化的氨基氮原子,使得聚合物网络在任何pH下都能充当有效的“质子海绵”体。其转染性能好于树枝状聚合物,而且它的细胞毒性低。

PEI 细胞转染液使用方法:

瞬时转染方法

1. 接种细胞:转染前一天,用胶原酶消化细胞并计数(不建议用胰酶)。调整细胞浓度,将细胞铺入细胞培养的器皿,每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到 70~80%。

2. 准备 DNA-PEI 复合物: DNA、EZ Trans 试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。依据下表所示,用 Opti-MEM ITM(Invitrogen)或其他适合的无蛋白培养基稀释适量 DNA。用同样的培养基稀释EZ Trans 试剂。每 1 μg DNA 需用2-5 μL EZ Trans转染试剂。一边轻轻涡旋装有 DNA 溶液的试管,一边将稀释的EZ Trans转染试剂滴加至试管中(注意:请勿颠倒添加顺序)。充分混匀后,室温静置 10~25 min 以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时,请用圆底聚丙烯管,例如 Falcon 5 mL /14 mL 离心管。

3. 转染细胞:直接向每个孔中加入 DNA-PEI复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时,去除生长培养基,替换成无血清培养基,然后滴DNA-PEI复合物。转染 3 h 后,添加1/2体积的包含 30%血清的生长培养基。

4. 孵育细胞和分析结果:在 CO2培养箱中 37℃下孵育细胞至可以分析检测。转染后最快 7h 即可检测到转入基因的表达。请自行确定最适合检测时间。

http://www.chem17.com/st325538/product_25824580.html 
http://www.life-ilab.com.cn/ParentList-1433826.html

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